產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
一步法鼠尾DNA純化試劑盒：
快速、高效、可靠的DNA提取方式
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貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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AN101 |
BcMag公司? 一步法鼠尾DNA純化試劑盒 |
50 preps |
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AN102 |
BcMag公司? 一步法鼠尾DNA純化試劑盒 |
100 preps |
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組分 |
存儲條件 |
50個preps，目錄號#AN101 |
100 preps，目錄號#AN102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
運(yùn)輸和儲存：根據(jù)上表，在收到貨物時儲存各組分。
簡介
從在一些生物學(xué)研究中，對于老鼠尾巴或耳朵DNA的提取方式可能非常耗時和浪費(fèi)體力。在一些特殊應(yīng)用當(dāng)中，如使用小鼠
尾部DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)基因小鼠基因分型實(shí)驗(yàn)，則需要長鏈DNA的提取方法。例如，傳統(tǒng)的小鼠尾部DNA提取需要用蛋白酶K進(jìn)行4小時至過夜的消化，然后進(jìn)行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀操作。其他提取技術(shù)，如使用二氧化硅材質(zhì)原料結(jié)合DNA，并進(jìn)行清洗洗脫的試劑盒，最近也已可用與此類核酸的提取。這種提取技術(shù)是基于正相色譜純化選擇的方式。使用高濃度鹽裂解結(jié)合溶液，如鹽酸胍，將DNA與二氧化硅結(jié)合。在結(jié)合核酸后，再使用鹽/乙醇溶液清洗硅膠柱或硅膠磁珠，從樣品中清除雜質(zhì)生物分子。最后，使用Tris緩沖液或水洗脫硅膠柱或硅膠磁珠，以洗脫下純凈的DNA。這種結(jié)合-清洗-洗脫的操作過程非常耗時，而且需要多次清洗和移液操作。重復(fù)的移液步驟會導(dǎo)致DNA大量丟失（20-40%）和DNA鏈的斷裂。此外，高鹽裂解液和其他雜質(zhì)，很容易殘留在洗脫的DNA或RNA中，對最終純度和定量以及下游酶活性（如PCR反應(yīng)酶）產(chǎn)生影響。
BcMag? Onestep Mouse Tail DNA Direct Kit 可以從小鼠尾巴、耳朵、耳洞或其他動物組織中，快速的提取出基因組DNA，純化過程無需使用純化柱。該試劑盒使用我們獨(dú)特的專利磁珠和緩沖液，可以有效地裂解細(xì)胞，然后磁珠會有效的去除掉緩沖液中的所有雜質(zhì)，使DNA保留在上清液中。該提取過程采用溫和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解條件下，如堿性裂解和使用有毒化學(xué)品用于裂解細(xì)胞對核酸的損害，這樣就保持了DNA完整性和去除了從樣品中清除有機(jī)溶劑的耗時過程。此外，本產(chǎn)品中的磁珠在不用于提取DNA的情況下，也可在單個步驟中用于從樣品中清除PCR抑制劑（圖1），而無需DNA提取步驟。
本試劑盒提取過程增加了DNA的完整性，提高了核酸的產(chǎn)量，并最大程度地減少了傳統(tǒng)DNA提取技術(shù)過程中，耗時的“結(jié)合-洗滌-洗脫”操作過程引起的DNA損失。樣品裂解后，僅需簡單的一步提取過程可以同時處理>96個樣品，并在不到30分鐘內(nèi)完成DNA純化。純化的基因組DNA具有極高的完整性，可用于各種下游應(yīng)用，如qPCR。
圖2一步法鼠尾DNA分離試劑盒的工作流程
本款磁珠是特別設(shè)計的，它一旦與細(xì)胞裂解液混合，就能快速捕獲雜質(zhì)。然后，純凈的DNA保留在溶液中，磁珠-雜質(zhì)復(fù)合物被磁鐵磁性吸附去除。
1.向樣品中添加功能磁珠。
2.將樣品與磁珠和蛋白酶K混合以裂解細(xì)胞。
3.通過旋轉(zhuǎn)/吹吸方式混合磁珠，以捕獲PCR抑制劑。
4.用磁座去除磁珠。
5.吸取純凈的DNA/RNA的上清液
應(yīng)用
純化的DNA可用于下游應(yīng)用，例如PCR，qPCR，單核苷酸多態(tài)性（SNP），短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）基因分型，基因分型，新一代測序（NGS，獸醫(yī)基因分型等）。
特點(diǎn)和優(yōu)勢：
l 快速高效的純化方案：無需液體轉(zhuǎn)移，只需一個試管，無需事先分離DNA，可直接用于放大實(shí)驗(yàn)的工作流程。
l 節(jié)約時間成本：可在不到一小時內(nèi)處理96個樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質(zhì)、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價陽離子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性價比高：無需離心柱、過濾器、不用反復(fù)的重復(fù)移液和使用有機(jī)試劑。
l 可用于高通量實(shí)驗(yàn)：與許多不同的全自動核酸提取系統(tǒng)兼容。
