產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
一步法昆蟲DNA純化試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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AM101 |
BcMag ? 一步法昆蟲DNA純化試劑盒 |
50 preps |
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AM102 |
BcMag ? 一步法昆蟲DNA純化試劑盒 |
100 preps |
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組件 |
存儲 |
50 preps，目錄號#AM101 |
100 preps，目錄號#AM102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
運(yùn)輸和儲存：根據(jù)上表，在收到貨物時(shí)儲存各組分。
“BcMag? 一步法昆蟲DNA純化試劑盒可以從新鮮，冷凍或儲存的昆蟲標(biāo)本（如蚊子，蜜蜂，虱子，蜱和黑腹果蠅）中快速，無需離心柱，提取高質(zhì)量基因組DNA。該試劑盒使用我們獨(dú)特的專有磁珠和緩沖液，有效裂解細(xì)胞，同時(shí)去除水性緩沖液中的PCR抑制劑類雜質(zhì)，使DNA不受影響。
簡介
入侵的昆蟲會破壞生態(tài)系統(tǒng)，每年造成數(shù)十億美元的管理成本和收入損失?？焖贆z測是防止入侵昆蟲傳播的關(guān)鍵步驟，但必須提高大規(guī)模樣本收集的檢測能力，例如從粘性陷阱中收集的昆蟲。使用定量PCR，測序基因分型（GBS）或新一代測序（NGS）進(jìn)行可重復(fù)的DNA分析需要從昆蟲中提取高質(zhì)量的DNA。
提取昆蟲DNA的標(biāo)準(zhǔn)流程可能非常耗時(shí)且需要大量手動操作。且在植物基因分型等特定應(yīng)用中需要長鏈DNA提取方法。例如，傳統(tǒng)的植物DNA提取需要用蛋白酶K消化4小時(shí)至過夜，然后進(jìn)行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀。其他技術(shù)，例如二氧化硅結(jié)合和洗脫試劑盒，近些年已經(jīng)非常成熟。這些技術(shù)基于陽性色譜純化選擇。高濃度的鹽溶液（例如鹽酸胍）會將DNA與二氧化硅結(jié)合。核酸結(jié)合后，用鹽/乙醇溶液洗滌二氧化硅離心柱或磁珠，以清除樣品中的其他生物分子。最后，使用Tris洗脫緩沖液或水洗脫離心柱或磁珠以洗脫純化后DNA。這種結(jié)合-清洗-洗脫過程非常耗時(shí)，需要多次清洗和移液步驟。重復(fù)的移液步驟會導(dǎo)致相當(dāng)大的DNA損失（20-40%）和丟失。此外，高鹽溶液和其他雜質(zhì)很容易殘留進(jìn)洗脫的DNA或RNA中，損害最終的純度和定量以及下游的酶活性，如PCR。
BcMag? 一步法昆蟲DNA純化試劑盒可以從新鮮，冷凍或儲存的昆蟲標(biāo)本（如蚊子，蜜蜂，虱子，蜱和黑腹果蠅）中快速，無需離心柱，提取高質(zhì)量基因組DNA。該試劑盒使用我們獨(dú)特的專有磁珠和緩沖液，有效裂解細(xì)胞，同時(shí)去除水性緩沖液中的PCR抑制劑類雜質(zhì)，使DNA不受影響。該提取過程采用溫和的裂解條件，避免了嚴(yán)苛裂解條件對核酸的破壞，如堿性裂解和有毒化學(xué)物質(zhì)裂解細(xì)胞；保證了DNA的完整性和避免了殘留在樣品中有機(jī)溶劑耗時(shí)的清除過程。此外，本試劑盒中磁珠還可以一步從樣品中清除PCR抑制劑（圖1），而無需DNA提取過程。
本試劑盒提取過程增加了DNA的完整性，提高了核酸的產(chǎn)量，并最大程度地減少了傳統(tǒng)DNA提取技術(shù)過程中，耗時(shí)的“結(jié)合-洗滌-洗脫”操作過程引起的DNA損失。樣品裂解后，僅需簡單的一步提取過程可以同時(shí)處理>96個(gè)樣品，并在不到30分鐘內(nèi)完成DNA純化。純化的基因組DNA具有極高的完整性，可用于各種下游應(yīng)用，如qPCR。
圖2一步法昆蟲DNA提取試劑盒的工作流程
1. 使用鋼珠在打珠器中破碎樣品。
2. 離心并將上清液轉(zhuǎn)移到新試管中。
3. 將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并加熱以裂解細(xì)胞。
4. 渦旋磁珠以捕獲PCR抑制劑。
5. 用磁力架吸附磁珠。
6. 吸出含有純凈DNA的上清液。
性能
純化的DNA可用于許多下游應(yīng)用，例如PCR，qPCR，單核苷酸多態(tài)性（SNP），短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）基因分型，基因分型，新一代測序（NGS，獸醫(yī)基因分型等）。
特點(diǎn)和優(yōu)勢：
? 快速有效的提取方案：無需事先進(jìn)行DNA分離，細(xì)胞裂解后可直接僅需純化流程，不需要液體轉(zhuǎn)移，僅需一個(gè)試管。
l 節(jié)約時(shí)間成本：可在不到一小時(shí)內(nèi)處理96個(gè)樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質(zhì)、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價(jià)陽離子，如Ca2+、Mg2+等（見圖片2“PCR抑制劑去除”）。
l 性價(jià)比高：無需離心柱、過濾器、不用反復(fù)的重復(fù)移液和使用有機(jī)試劑。
? 可用于高通量實(shí)驗(yàn)：與許多不同的全自動核酸提取系統(tǒng)兼容
