產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
從真菌和酵母中快速提取DNA
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AL101 |
BcMag ? 一步法真菌和酵母DNA純化試劑盒 |
50 preps |
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AL102 |
BcMag ? 一步法真菌和酵母DNA純化試劑盒 |
100 preps |
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組分 |
存儲(chǔ)條件 |
50 preps，貨號(hào)#AL101 |
100 preps，貨號(hào)#AL102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
搬運(yùn)和儲(chǔ)存：根據(jù)上表在到達(dá)時(shí)儲(chǔ)存套件組件。
簡(jiǎn)介
真菌和酵母菌是許多研究領(lǐng)域的必需微生物，包括醫(yī)學(xué)，農(nóng)業(yè)和環(huán)境科學(xué)。然而，他們的DNA提取可能是一個(gè)具有挑戰(zhàn)性且耗時(shí)的過程。
提取真菌和酵母DNA的標(biāo)準(zhǔn)流程可能非常耗時(shí)且需要大量手動(dòng)操作。在真菌和酵母菌基因分型等特定應(yīng)用中需要較長(zhǎng)的DNA鏈提取方法。例如，傳統(tǒng)的真菌和酵母DNA提取需要用蛋白酶K消化4小時(shí)至過夜，然后進(jìn)行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀。其他技術(shù)，例如二氧化硅結(jié)合和洗脫試劑盒，近些年已經(jīng)非常成熟。這些技術(shù)基于陽性色譜純化選擇。高濃度的鹽溶液（例如鹽酸胍）會(huì)將DNA與二氧化硅結(jié)合。核酸結(jié)合后，用鹽/乙醇溶液洗滌二氧化硅離心柱或磁珠，以清除樣品中的其他生物分子。最后，使用Tris洗脫緩沖液或水洗脫離心柱或磁珠以洗脫純化后DNA。這種結(jié)合-清洗-洗脫過程非常耗時(shí)，需要多次清洗和移液步驟。重復(fù)的移液步驟會(huì)導(dǎo)致相當(dāng)大的DNA損失（20-40%）和丟失。此外，高鹽溶液和其他雜質(zhì)很容易殘留進(jìn)洗脫的DNA或RNA中，損害最終的純度和定量以及下游的酶活性，如PCR。
Bioclone開發(fā)了一種名為“一步法真菌和酵母DNA純化試劑盒”的試劑盒，以應(yīng)對(duì)從真菌和酵母中提取DNA的挑戰(zhàn)。
一步法真菌和酵母DNA純化試劑盒是從真菌和酵母等微生物中高效快速提取DNA的重要工具。其獨(dú)特的專有磁珠和緩沖液體系提供一種溫和的細(xì)胞裂解環(huán)境，同時(shí)去除雜質(zhì)；避免惡劣條件和有毒化學(xué)品使用。一步純化技術(shù)允許同時(shí)處理許多樣品，增加DNA完整性并減少DNA損失。純化的基因組DNA質(zhì)量極高，適用于各種下游應(yīng)用，例如qPCR。使用本試劑盒，研究人員可以簡(jiǎn)化DNA提取過程，節(jié)省時(shí)間并降低成本。
一步法真菌、酵母DNA純化試劑盒的工作流程
1. 使用鋼珠在打珠器中破碎樣品。
2. 離心并將上清液轉(zhuǎn)移到新試管中。
3. 將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并加熱以裂解細(xì)胞。
4. 渦旋磁珠以捕獲PCR抑制劑。
5. 用磁力架吸附磁珠。
6. 吸出含有純凈DNA的上清液。
專有磁珠和緩沖液，可有效裂解細(xì)胞和去除雜質(zhì)
一步法真菌和酵母DNA純化試劑盒采用獨(dú)特的專有磁珠和緩沖系統(tǒng)，可有效裂解細(xì)胞并去除PCR抑制劑（多酚化合物，腐殖酸/富里酸，酸性多糖，單寧，黑色素，肝素，洗滌劑，牛仔布染料，二價(jià)陽離子，如Ca2+，Mg2+等），同時(shí)在水性緩沖液中，使DNA不受影響。這種溫和的裂解方法可以保持DNA的完整性，避免堿性裂解和有毒化學(xué)物質(zhì)等惡劣條件。此外，磁珠可以一步從樣品中消除PCR抑制劑，增強(qiáng)DNA完整性，提高核酸產(chǎn)量，并最大程度地減少DNA損失。
圖1：PCR抑制劑去除效果
高質(zhì)量DNA的一步純化技術(shù)
一步法真菌和酵母DNA純化試劑盒采用一步法純化技術(shù)，可同時(shí)處理96個(gè)樣品，并在不到30分鐘內(nèi)完成DNA純化。這種簡(jiǎn)單的提取方法，不需要現(xiàn)有的DNA提取技術(shù)中耗時(shí)的“結(jié)合-洗滌-洗脫”過程，并提高了DNA的完整性。純化的基因組DNA具有極高的質(zhì)量，適用于各種下游應(yīng)用，例如qPCR。
一步法真菌酵母DNA純化試劑盒的優(yōu)點(diǎn)
? 從真菌和酵母中快速有效地提取DNA：一步，一管，無需液體轉(zhuǎn)移。
? 獨(dú)特的專有磁珠和緩沖系統(tǒng)，使用溫和的細(xì)胞裂解條件，同時(shí)去除雜質(zhì)
? 僅需一步清除各種PCR抑制劑
? 提取出的高質(zhì)量DNA適合各種下游應(yīng)用
? 同時(shí)處理>96個(gè)樣品
? 不需要色譜柱，減少了提取時(shí)間和成本。
