產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
骨骼和牙齒DNA純化試劑盒
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貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
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AB101 |
BcMag ? 骨骼DNA純化試劑盒 |
50preps |
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AB102 |
BcMag ? 骨骼DNA純化試劑盒 |
100preps |
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組件 |
存儲(chǔ)條件 |
目錄號(hào)：AB-101（50Preps） |
目錄號(hào)：AB-102（100 Preps ） |
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BcMag? HO-DNA Beads |
4°C |
0.75 ml |
1.5 ml |
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1x Lysis Buffer |
4°C |
5.0 ml |
10 ml |
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1x Elution Buffer |
4°C |
1.5ml |
3.0ml |
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Proteinase K (20mg/ml) |
-20°C |
10 mg |
20 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
0.5 ml |
1.0 ml |
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1 M DTT |
-20°C |
77 mg |
154 mg |
搬運(yùn)和儲(chǔ)存：根據(jù)上表，在收到商品時(shí)儲(chǔ)存試劑盒中各組分。
簡(jiǎn)介
骨骼和牙齒通常是鑒定人類(lèi)遺骸的唯一DNA樣本。從骨骼和牙齒中純化出DNA在許多分子生物學(xué)應(yīng)用中都很重要，包括法醫(yī)分析，古代DNA分析和遺傳研究。且從骨骼和牙齒等復(fù)雜樣品中有效提取DNA比使用新鮮的生物組織要困難得多。因?yàn)?，骨骼是一種高度組織化、復(fù)雜化和專(zhuān)門(mén)化的結(jié)締組織，具有極高的鈣離子濃度。骨中的大部分DNA存在于骨細(xì)胞中。由于骨骼是具有高鈣含量的剛性結(jié)締組織，骨骼和牙齒中的DNA通常比軟組織中的DNA保存得更好。而骨骼中的牙齒則由牙釉質(zhì)、牙本質(zhì)、牙骨質(zhì)和牙髓組織組成。牙本質(zhì)和牙髓都含有DNA。由于骨骼是高度礦化的組織，選擇有效的DNA提取方式，對(duì)于消除PCR抑制劑和避免DNA提取溶液中參雜過(guò)多礦物至關(guān)重要。
從長(zhǎng)期暴露于各種環(huán)境條件下的骨骼和牙齒中提取DNA和進(jìn)行STR數(shù)據(jù)分析，已成為識(shí)別失蹤人員和指認(rèn)未知遺骸的有力工具。這類(lèi)檢材由于礦化嚴(yán)重、內(nèi)源性DNA含量低、收環(huán)境，細(xì)菌等影響、死后DNA損傷，以及存在與DNA樣本共同提取的環(huán)境物質(zhì)中存在大量PCR抑制劑，因此，從受損樣本中回收DNA仍然具有挑戰(zhàn)性。盡管目前已經(jīng)有一些核酸提取技術(shù)可用于骨骼DNA提取，但用于法醫(yī)檢測(cè)的骨骼核酸提取方式仍存在一些缺陷。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，DNA模板含量低、有顯著降解和普遍存在的PCR抑制成分，這些因素都會(huì)對(duì)樣本的識(shí)別造成影響，限制STR圖譜的發(fā)展。由于上述影響因素，選擇有效的DNA提取方式對(duì)于最大量減少礦物質(zhì)提取時(shí)殘留和去除聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）抑制劑至關(guān)重要。
BcMag? Bone and Teeth DNA Purification Kit是經(jīng)過(guò)獨(dú)特設(shè)計(jì)的，用于從骨骼和牙齒樣本中高效、有序地提取總核酸。該試劑盒使用我們獨(dú)特的專(zhuān)有磁珠與經(jīng)過(guò)優(yōu)化的脫礦緩沖液相結(jié)合，以提高DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量。純化的基因組DNA具有極高的完整性，可用于各種下游應(yīng)用，如qPCR、STR等。該核酸提取過(guò)程采用溫和的裂解條件，避免了苛刻條件，如堿性裂解，和使用裂解細(xì)胞的有毒化學(xué)品對(duì)核酸的損害，以保持DNA完整性，并且提取過(guò)程無(wú)需耗時(shí)的從樣品中清除有機(jī)溶劑。
骨骼DNA分離的工作流程
1.向樣品中加入裂解緩沖液和蛋白酶K裂解骨骼，并在65°C下孵育24小時(shí)。
2.添加功能性磁珠，并將磁珠與樣品一起渦旋或吹吸混勻，結(jié)合DNA。
3.清洗磁珠
4.使用磁力分離器從樣品中分離磁珠。
5.從磁珠上洗脫DNA
骨骼和牙齒DNA提取純化試劑盒用于多種分子生物學(xué)應(yīng)用，包括：
?法醫(yī)分析：從骨頭和牙齒中提取的DNA通常用于法醫(yī)分析，以識(shí)別個(gè)人并破案。
?古代DNA分析：從骨骼和牙齒中提取的DNA可用于研究古代種群和物種的遺傳學(xué)。
?遺傳學(xué)研究：從骨骼和牙齒中提取的DNA通常用于遺傳學(xué)研究，以確定某些基因突變或標(biāo)記的存在。
特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)：
?高質(zhì)量DNA提?。汗趋篮脱例X是難以液化的堅(jiān)韌組織，但骨骼和牙齒DNA純化試劑盒提供了專(zhuān)門(mén)用于提取高質(zhì)量DNA的試劑和方案。
?易于使用：骨骼和牙齒DNA純化試劑盒易于使用，為從骨骼和牙齒中純化DNA提供了一個(gè)簡(jiǎn)單的操作過(guò)程。
?高產(chǎn)率：骨骼和牙齒DNA純化試劑盒旨在提高DNA提取的回收率，這對(duì)下游應(yīng)用非常重要。
一般參考資料
1. Loreille OM, Diegoli TM, Irwin JA, Coble MD, Parsons TJ. High efficiency DNA extraction from bone by total demineralization. Forensic Sci Int Genet. 2007 Jun;1(2):191-5
2. Mckinnon M, Henneberg M, Higgins D. A review of the current understanding of burned bone as a source of DNA for human identification. Sci Justice. 2021 Jul;61(4):332-338.
3. Jakubowska J, Maciejewska A, Paw?owski R. Comparison of three methods of DNA extraction from human bones with different degrees of degradation. Int J Legal Med. 2012 Jan;126(1):173-8.
4. Emery MV, Bolhofner K, Winingear S, Oldt R, Montes M, Kanthaswamy S, Buikstra JE, Fulginiti LC, Stone AC. Reconstructing full and partial STR profiles from severely burned human remains using comparative ancient and forensic DNA extraction techniques. Forensic Sci Int Genet. 2020 May;46:102272.
5. Prediction of autosomal STR typing success in ancient and Second World War bone samples. Zupani? Pajni? I, Zupanc T, Bala?ic J, Ger?ak ?M, Stojkovi? O, Skadri? I, ?re?nar M. Forensic Sci Int Genet. 2017 Mar;27:17-26.
